實驗前準備要點：

1.     準備各種實驗儀器及材料（如：37℃恒溫箱，450nm酶標儀、高速離心機、高精度加樣器及槍頭等等）

2.     按照生物實驗室安全防護條例，穿著實驗服并佩戴乳膠手套做好防護工作

3.     使用前應將試劑盒內各試劑取出，平衡至室溫（至少30分鐘）

4.     嚴格按照說明書的操作方法進行操作。說明書以英文說明書為準。

大鼠血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA檢測試劑盒操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

操作注意事項：

1.  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結晶溶解后再使用。

2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3.  濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，最終結果乘以5才是樣本實際濃度。

4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

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大鼠血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA檢測試劑盒關于樣本的采集：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天就進行檢測的標本儲存在4℃?zhèn)溆?。如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-80℃條件下保存。但注意避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-80℃可保存6個月。部分激素類標本需添加。

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